Fragmento F (ab') 2

Qué es el fragmento F(ab')2

Mientras que la papaína corta la inmunoglobulina por encima de los puentes disulfuro intercatenarios y produce dos fragmentos Fab independientes, la pepsina actúa por debajo de esos mismos enlaces. El resultado es una molécula en la que ambos brazos del anticuerpo permanecen unidos entre sí a través de un corto segmento bisagra, mientras que el resto de la región Fc se degrada en pequeños péptidos sin actividad biológica, denominados pFc'. La nomenclatura lo refleja: la prima (') indica que cada mitad retiene una porción del segmento bisagra; el subíndice 2 señala que se trata de un dímero de dos unidades Fab'.

Con un peso molecular de unos 110 kDa (frente a los 150 kDa de la IgG intacta y los 50 kDa de un Fab aislado), el F(ab')2 ocupa un lugar intermedio que le confiere propiedades útiles: es lo bastante grande para retener la bivalencia, pero lo bastante pequeño para penetrar tejidos mejor que el anticuerpo completo.

Diferencia con el fragmento Fab

La distinción principal es funcional. Un Fab individual solo puede unirse a un epítopo (monovalente), lo que le impide formar redes antígeno-anticuerpo; no precipita ni aglutina. El F(ab')2, al conservar dos sitios de unión, sí puede entrelazar dos moléculas de antígeno y producir reacciones de aglutinación o precipitación visibles en el laboratorio. Ambos fragmentos comparten, eso sí, la ausencia de funciones efectoras mediadas por Fc.

Si se tratan los puentes disulfuro de la bisagra con un agente reductor suave (como 2-mercaptoetilamina), el F(ab')2 se escinde en dos fragmentos Fab', cada uno con un grupo tiol libre en el extremo de la bisagra. Ese tiol permite conjugar el Fab' con moléculas reporteras (biotina, fluorocromos, enzimas), una estrategia habitual en el diseño de reactivos para inmunofluorescencia e inmunoensayo.

Preguntas frecuentes

¿Qué enzima genera el F(ab')2?

La pepsina, una proteasa ácida del jugo gástrico. Escinde la IgG por debajo de los puentes disulfuro intercatenarios de la región bisagra, lo que mantiene unidos ambos brazos Fab'. La papaína, en cambio, corta por encima y separa cada Fab del Fc.

¿El F(ab')2 puede activar el complemento?

No. La activación de la vía clásica del complemento requiere la unión de C1q a los dominios CH2 del fragmento Fc. Como la pepsina degrada prácticamente toda la región Fc, el F(ab')2 carece de esa capacidad. Tampoco se une a los receptores Fc celulares.

¿Por qué la nomenclatura incluye un apóstrofo?

El apóstrofo indica que cada unidad Fab conserva una porción adicional de la región bisagra, ausente en el Fab obtenido con papaína. Esa cola extra contiene residuos de cisteína responsables de los puentes disulfuro que mantienen unidas las dos mitades del F(ab')2. En bioquímica de proteínas, la prima se utiliza por convención para señalar que un fragmento retiene una extensión peptídica respecto de otro fragmento de referencia.

Referencias

1. Janeway CA, Travers P, Walport M, Shlomchik MJ. Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. 5.ª ed. Nueva York: Garland Science; 2001. Capítulo 3: Structure of the antibody molecule. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK27144/
2. Thermo Fisher Scientific. F(ab) and F(ab')2 Fragment Secondary Antibodies. Disponible en: https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/secondary-antibodies
3. Sigma-Aldrich. Antibody Fragmentation with Pepsin Digestion. Disponible en: https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/technical-article/protein-biology
4. Sociedad Española de Farmacia Hospitalaria. Capítulo 11: Inmunología. Manual del Residente de Farmacia Hospitalaria. Disponible en: https://www.sefh.es/bibliotecavirtual/fhtomo2/CAP11.pdf