Tipaje HLA

Qué es el tipaje HLA

Tipaje procede de "tipo", del griego τύπος (týpos, "molde" o "impronta"), y designa aquí la operación de asignar a una persona su tipo dentro del sistema HLA, el conjunto de genes del complejo mayor de histocompatibilidad humano. Conviene no confundir el tipaje, que es la técnica de laboratorio, con la compatibilidad HLA, que es el grado de coincidencia que se calcula después, comparando el resultado del donante con el del receptor.

El método serológico y su origen

La primera forma de tipaje fue serológica. En 1964, Paul Terasaki y John McClelland, en la Universidad de California en Los Ángeles, publicaron en la revista Nature la prueba de microcitotoxicidad: mezclaban linfocitos del paciente con distintos antisueros de especificidad HLA conocida y con complemento de conejo, y observaban al microscopio qué combinaciones destruían las células. La reacción positiva revelaba qué antígeno portaba el linfocito. Aquella prueba, tan sencilla que solo necesitaba un microlitro de suero, se convirtió en 1970 en el estándar internacional para el tipaje de tejidos y siguió empleándose durante más de dos décadas.

Los métodos moleculares

La llegada de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en los años ochenta abrió una vía distinta: leer directamente en el ADN las secuencias que codifican cada variante HLA, sin depender de antisueros ni de la viabilidad de las células. Las primeras técnicas moleculares hibridaban el producto de PCR con sondas de secuencia específica (PCR-SSO); en 1992, Olerup y Zetterquist publicaron un método más rápido, la amplificación con cebadores de secuencia específica (PCR-SSP), capaz de dar un resultado de tipaje del HLA-DR en apenas dos horas. Con el tiempo se sumaron la secuenciación dirigida y, más recientemente, la secuenciación de nueva generación, que permite una resolución alélica muy superior a la que ofrecía la serología original.

Estos métodos no compiten entre sí en un sentido estricto de sustitución total: la serología resulta todavía útil para confirmar con rapidez si un antígeno se expresa realmente en la superficie celular, algo que la secuenciación del ADN no puede garantizar por sí sola.

Alta y baja resolución

Los laboratorios distinguen entre tipaje de baja resolución, que identifica el grupo antigénico amplio (equivalente, en general, al resultado que daba la serología), y tipaje de alta resolución, que llega al nivel del alelo concreto. El trasplante de progenitores hematopoyéticos entre donante no emparentado y receptor exige casi siempre alta resolución en los loci HLA-A, -B, -C, -DRB1 y -DQB1, porque incluso una diferencia mínima en un solo alelo puede condicionar el resultado del trasplante.

Preguntas frecuentes

¿El tipaje HLA es lo mismo que la prueba cruzada?

No. El tipaje describe qué antígenos HLA tiene cada persona por separado. La prueba cruzada enfrenta directamente el suero del receptor con células del donante concreto para detectar anticuerpos preformados, un paso posterior y distinto.

¿Sigue usándose la serología?

De forma minoritaria. Los métodos moleculares la han desplazado como técnica principal desde los años noventa, aunque algunos laboratorios la conservan para resolver dudas puntuales sobre la expresión del antígeno.

¿Cuánto suero necesitaba la prueba original de Terasaki?

Un microlitro por reacción, una cantidad extraordinariamente pequeña para la tecnología de 1964 y que explica en buena parte por qué el método se impuso con tanta rapidez.

¿El tipaje HLA solo sirve para trasplantes?

No. También se emplea en estudios de asociación entre determinados alelos HLA y enfermedades autoinmunitarias, y en investigación sobre paternidad biológica antes de que se generalizaran las pruebas de ADN actuales.

¿Qué diferencia hay entre PCR-SSO y PCR-SSP?

La primera hibrida el ADN amplificado con sondas marcadas; la segunda usa cebadores que solo amplifican si la secuencia diana coincide exactamente, de modo que basta ver si hay o no producto de PCR para leer el resultado. Esta última resultó más rápida en la práctica de rutina.

Referencias

1. Terasaki PI, McClelland JD. Microdroplet assay of human serum cytotoxins. Nature. 1964;204:998-1000.
2. Olerup O, Zetterquist H. HLA-DR typing by PCR amplification with sequence-specific primers (PCR-SSP) in 2 hours: an alternative to serological DR typing in clinical practice. Tissue Antigens. 1992;39(5):225-235.
3. Erlich H. HLA DNA typing: past, present, and future. Tissue Antigens. 2012;80(1):1-11.
4. Frontiers in Transplantation. Paul Ichiro Terasaki (1929-2016): inventor of the microcytotoxicity assay and pioneer tissue typer. 2024. Consultar fuente