Electroforesis en gel de poliacrilamida

Qué es la electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS

La técnica se basa en dos elementos que actúan de forma complementaria. El dodecilsulfato sódico (SDS) es un detergente aniónico que desnaturaliza las proteínas, les confiere una carga negativa uniforme proporcional a su masa y anula las diferencias de forma y carga intrínseca. El gel de poliacrilamida funciona como un tamiz molecular: se forma al polimerizar acrilamida con bisacrilamida, y el tamaño de sus poros depende de la concentración de ambos monómeros. Combinados, SDS y gel hacen que las proteínas migren estrictamente según su peso molecular, de menor a mayor.

El nombre "electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de dodecilsulfato sódico" es la descripción completa en castellano de lo que la sigla SDS-PAGE condensa. La terminología puede resultar confusa porque el acrónimo incluye ya la referencia al gel (PAGE = polyacrylamide gel electrophoresis) y al detergente (SDS), de modo que "SDS-PAGE" y el nombre descriptivo largo son equivalentes. Ulrich K. Laemmli publicó en 1970 el sistema de gel discontinuo (con un gel concentrador y un gel separador) que se convirtió en el protocolo estándar y sigue siéndolo en la mayoría de los laboratorios del mundo. Su artículo en Nature es uno de los más citados de la historia de la biología.

Usos en investigación y en clínica

En investigación, la SDS-PAGE permite verificar la pureza de una preparación proteica, estimar su peso molecular comparándolo con marcadores de tamaño conocido y servir como primer paso para técnicas como el Western blot (en el que las proteínas separadas se transfieren a una membrana y se detectan con anticuerpos específicos). En el laboratorio clínico su papel es más limitado que el de la electroforesis capilar o la electroforesis en acetato de celulosa, que son las que generan el proteinograma sérico de rutina. Con todo, la SDS-PAGE aparece en procedimientos de referencia para la caracterización de variantes de hemoglobina, la identificación de proteínas en líquido cefalorraquídeo y la validación de reactivos biológicos.

Preguntas frecuentes

¿Es lo mismo PAGE que SDS-PAGE?

No exactamente. PAGE es el acrónimo genérico de la electroforesis en gel de poliacrilamida, que puede realizarse en condiciones nativas (conservando la estructura tridimensional de la proteína) o en condiciones desnaturalizantes con SDS. Cuando se añade SDS, la técnica pasa a llamarse SDS-PAGE, que es la variante con diferencia más habitual.

¿Por qué esta entrada y la de SDS-electroforesis describen lo mismo?

Porque son dos formas de nombrar la misma técnica: una usa el nombre descriptivo largo en castellano ("electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de dodecilsulfato sódico") y la otra emplea las siglas internacionales (SDS-PAGE). La información clínica completa puede consultarse en la entrada SDS-electroforesis en gel de poliacrilamida.

¿Qué hizo Laemmli?

Ulrich K. Laemmli publicó en 1970 un sistema de gel discontinuo con dos fases (gel concentrador y gel separador) que mejoraba la resolución de las bandas proteicas. Su protocolo se adoptó universalmente y apenas ha variado en más de medio siglo.

Referencias

1. Biblioteca Nacional de Medicina de Estados Unidos. Proteínas totales y relación albúmina/globulina (A/G). MedlinePlus, pruebas de laboratorio.
2. Manual MSD, versión para profesionales. Mieloma múltiple. Hematología y oncología.
3. Real Academia Española. Electroforesis. Diccionario de la lengua española.
4. Biblioteca Nacional de Medicina de Estados Unidos. Electroforesis de proteínas en suero. MedlinePlus, enciclopedia médica en español.