PAS diastasa o ácido periódico de Schiff

Qué es la técnica PAS-diastasa

Es un método de histoquímica, no una prueba de laboratorio en sangre: se aplica directamente sobre cortes de tejido fijados y montados en el microscopio. El nombre reúne tres piezas independientes. «PAS» son las siglas del inglés periodic acid-Schiff, ácido peryódico de Schiff; «ácido peryódico» combina el prefijo químico per-, que en la nomenclatura tradicional indica el grado máximo de oxidación de un elemento, con «yódico», relativo al yodo, del griego ioeidés, «de aspecto violeta», por el color de sus vapores.

Schiff es un epónimo. Honra al químico Hugo Schiff, cuyo reactivo de fucsina decolorada con ácido sulfuroso es la base de la reacción; puede consultarse su biografía en la entrada dedicada a la base de Schiff. La diastasa es el nombre con el que los químicos franceses Anselme Payen y Jean-François Persoz bautizaron en 1833 la primera enzima aislada de la historia, la que hoy se conoce como amilasa: lo llamaron así por el griego diástasis, «separación», ya que la enzima separaba el almidón de la cebada en azúcares solubles.

Fundamento químico

Los anillos de las hexosas, azúcares como la glucosa que forman el glucógeno y buena parte de los mucopolisacáridos, tienen carbonos adyacentes con grupos hidroxilo. El ácido peryódico rompe el enlace entre esos carbonos y los transforma en grupos aldehído. Las hexosaminas de los glucosaminoglucanos siguen un camino parecido, aunque alternan grupos hidroxilo con grupos amino.

Esos aldehídos recién formados son los que reaccionan con el reactivo de Schiff, una fucsina que ha perdido su color al combinarse con ácido sulfuroso y que lo recupera, en tono magenta intenso, en cuanto encuentra un grupo aldehído libre. El resultado es visible directamente al microscopio óptico, sin necesidad de tinción de contraste, aunque suele añadirse hematoxilina para visualizar los núcleos celulares.

Para qué sirve la digestión con diastasa

El problema de la tinción PAS simple es que no distingue entre sustancias: el glucógeno, las mucinas neutras, las membranas basales y las paredes de ciertos hongos dan todos ellos un resultado positivo, del mismo color. La diastasa resuelve esa ambigüedad porque digiere específicamente el glucógeno antes de aplicar el ácido peryódico.

De ahí el protocolo comparativo habitual: se procesan dos cortes gemelos del mismo tejido, uno con PAS simple y otro con PAS-diastasa. Si una estructura se tiñe en el primero y desaparece en el segundo, se trataba de glucógeno. Si persiste teñida en ambos, corresponde a otra sustancia PAS-positiva, casi siempre mucina.

Qué revela en el tejido

La aplicación más directa es el estudio del glucógeno hepático y muscular, útil en el diagnóstico diferencial de las glucogenosis y de otras hepatopatías con depósito anómalo, como el déficit de alfa-1-antitripsina, en el que aparecen glóbulos citoplasmáticos resistentes a la digestión enzimática. También tiñe con nitidez la membrana basal, lo que la hace útil para valorar su engrosamiento en enfermedades como la nefropatía diabética.

En anatomía patológica tumoral, permite diferenciar un adenocarcinoma productor de mucina, que sigue positivo tras la digestión, de otros tumores que no lo son. La técnica revela además la pared de ciertos hongos, rica en polisacáridos, por lo que resulta de ayuda para localizar elementos fúngicos en un corte de tejido cuando la sospecha clínica lo justifica.

Preguntas frecuentes

¿Qué significan las siglas PAS?

Vienen del inglés periodic acid-Schiff, ácido peryódico de Schiff. El nombre combina la sustancia química que oxida el tejido, el ácido peryódico, con el apellido del químico cuyo reactivo revela el resultado.

¿Es lo mismo PAS que PAS-diastasa?

No. El PAS simple tiñe cualquier sustancia rica en carbohidratos. La versión con diastasa añade un paso previo que digiere el glucógeno, de modo que lo que sigue teñido después ya no puede ser esa sustancia.

¿Por qué se llama diastasa y no amilasa?

Por tradición histórica. Diastasa fue el nombre original que le dieron sus descubridores en 1833, casi un siglo antes de que se generalizara la terminación «-asa» para las enzimas. El término se mantuvo en histoquímica aunque en bioquímica clínica se prefiera hoy «amilasa».

¿Qué color toma el tejido con esta técnica?

Magenta o rojo púrpura en las estructuras PAS-positivas, sobre un fondo de núcleos azulados cuando se contratiñe con hematoxilina. Es una de las tinciones más vistosas de la histoquímica clásica.

¿Cuándo se emplea en la práctica clínica?

Sobre todo en anatomía patológica, para estudiar depósitos anómalos de glucógeno en el hígado, engrosamientos de membranas basales renales, tumores productores de mucina e infecciones fúngicas. Rara vez se pide de forma aislada: casi siempre acompaña a otras tinciones para completar el diagnóstico histológico.

Referencias

1. García Mendoza P, Arenas Guzmán R. Dermatología Cosmética, Médica y Quirúrgica. Hotchkiss y McManus y la tinción de PAS.
2. Dicciomed, Universidad de Salamanca. Diastasa.
3. RCPAQAP (Royal College of Pathologists of Australasia). Digestión con ácido peryódico de Schiff y diastasa (PAS+D).
4. MyPathologyReport.ca. ¿Qué es la diastasa del ácido peryódico de Schiff (PAS-D)?.