Hibridoma

Qué es un hibridoma

La técnica fue desarrollada en 1975 por Georges Köhler y César Milstein en el Laboratorio de Biología Molecular de Cambridge, trabajo que les mereció el Nobel de Fisiología o Medicina en 1984 junto con Niels Jerne. El problema que resolvieron era conceptualmente simple: un linfocito B activado fabrica el anticuerpo deseado, pero muere al cabo de unos días en cultivo; una célula de mieloma crece de forma indefinida, pero no produce el anticuerpo que se necesita. Si se fusionan ambas células, la célula resultante —el hibridoma— reúne lo mejor de cada una.

El nombre lo dice todo: "hibridoma" combina hybrid (célula híbrida, fusión de dos tipos celulares distintos) con el sufijo -oma (tumor, por la naturaleza tumoral de la línea de mieloma que aporta la inmortalidad proliferativa). Lo acuñaron los propios investigadores para describir el producto de esa fusión artificial.

De la fusión celular al anticuerpo monoclonal

El procedimiento parte de un animal —clásicamente un ratón— inmunizado con el antígeno contra el cual se quiere obtener el anticuerpo. Se extraen los linfocitos B de su bazo y se fusionan con células de una línea de mieloma murino que carece de la enzima HGPRT (hipoxantina-guanina fosforribosiltransferasa). La fusión se facilita con un agente químico, el polietilenglicol (PEG), que desestabiliza las membranas celulares y permite que dos células se fundan en una sola.

Después de la fusión, la mezcla contiene tres tipos de células: linfocitos B no fusionados, células de mieloma no fusionadas e hibridomas. Para seleccionar solo los hibridomas se utiliza un medio de cultivo especial llamado HAT (hipoxantina-aminopterina-timidina). En ese medio, las células de mieloma —que carecen de HGPRT— no pueden sobrevivir porque la aminopterina les bloquea la vía de síntesis de novo de nucleótidos y no disponen de la vía de salvamento. Los linfocitos B no fusionados mueren por sí solos al cabo de pocos días. Solo los hibridomas, que han heredado la HGPRT del linfocito y la capacidad proliferativa del mieloma, sobreviven y se expanden.

A partir de ahí, cada hibridoma se clona individualmente —se aísla en un pocillo— y se analiza el anticuerpo que secreta. Los clones que producen el anticuerpo con la especificidad deseada se seleccionan, se expanden y pueden mantenerse en cultivo o criopreservarse durante años. Un solo hibridoma puede proporcionar cantidades ilimitadas de un anticuerpo monoclonal idéntico, y esa es la razón de que la técnica transformara la inmunología y la biomedicina.

Preguntas frecuentes

¿Qué diferencia hay entre un hibridoma y un anticuerpo monoclonal?

El hibridoma es la fábrica; el anticuerpo monoclonal es el producto. La entrada anticuerpos monoclonales define qué son esas moléculas, sus tipos según el grado de humanización y sus aplicaciones.

¿Se siguen usando hibridomas hoy?

Sí, aunque coexisten con tecnologías más recientes. La técnica del hibridoma sigue siendo la forma más directa de obtener anticuerpos monoclonales murinos y es la base de la mayoría de los anticuerpos monoclonales de investigación. Para aplicaciones terapéuticas, sin embargo, se recurre cada vez más a técnicas de ingeniería genética (bibliotecas de anticuerpos recombinantes, ratones transgénicos con genes de inmunoglobulina humana) que permiten obtener anticuerpos humanizados o completamente humanos sin pasar por la fusión celular.

¿Por qué se necesita una célula de mieloma?

Porque el linfocito B normal tiene una vida limitada en cultivo y deja de dividirse al cabo de unos días. La célula de mieloma aporta la capacidad de proliferar indefinidamente (es una célula tumoral), lo que permite mantener el hibridoma en cultivo de forma permanente y producir anticuerpo sin interrupción.

Referencias

1. Instituto Nacional del Cáncer (NCI). Definición de anticuerpo monoclonal. Diccionario de cáncer del NCI.
2. Biblioteca Nacional de Medicina de Estados Unidos. Inmunoterapia contra el cáncer. MedlinePlus, enciclopedia médica en español.
3. Manual MSD, versión para profesionales. Componentes moleculares del sistema inmunitario.
4. Real Academia Española. Anticuerpo. Diccionario de la lengua española.