Bacteriología

Las bacterias son organismos unicelulares (formados por una sola célula) de tamaño muy pequeño (como máximo de algunas milésimas de milímetro de longitud). En general son capaces de desarrollarse de modo independiente en el medio en que viven. Son procariotas, puesto que su núcleo no está diferenciado y generalmente están cubiertas de una gruesa pared celular.

Muchas de estas bacterias son inofensivas y normalmente incapaces de causar una infección. Incluso son beneficiosas porque impiden la proliferación de otras especies patógenas o porque producen sustancias (vitaminas, por ejemplo) que precisa nuestro organismo.

Otras bacterias son capaces de causar infecciones sólo en determinadas circunstancias: cuando proliferan demasiado, o bien en personas con problemas en sus mecanismos de defensa (como sucede en las enfermedades del sistema inmunitario o al estar tomando determinados medicamentos). Finalmente, hay bacterias que son capaces de causar daño aún en circunstancias normales.

Cuando el médico piensa que un paciente puede estar infectado por una bacteria, tomará una muestra del lugar de la infección; por ejemplo un exudado (secreción) de la conjuntiva del ojo, en caso de conjuntivitis; o bien una muestra de orina si hay una infección urinaria; o de líquido cefalorraquídeo si se trata de una meningitis.

Las muestras pueden proceder de prácticamente cualquier lugar del organismo, y dependiendo de cuál sea éste, su obtención será más sencilla (heces u orina, por ejemplo) o más complicada y molesta (por ejemplo, el líquido de la articulación en caso de artritis).

La muestra se envía al laboratorio de microbiología, para su estudio, y hasta que sea procesada, se procurará que se altere lo menos posible. Por ello ha de transportarse y de mantenerse en condiciones adecuadas (por ejemplo, condiciones de temperatura y de contenido de oxígeno en ella).

Existen una serie de procedimientos básicos en bacteriología médica, incluyendo preparación de frotis, tinción de Gram y rayado de placas para aislamiento. Estos procedimientos son fundamentales para el estudio de los diferentes grupos bacterianos así como para el aislamiento y la identificación de bacterias de importancia médica a partir de diferentes tipos de muestras clínicas

Las muestras que contienen bacterias se extienden sobre una placa de vidrio que se denomina "portaobjetos", se deja secar y luego se fija (generalmente calentándola), para que no se desprenda y para preservar su morfología.

A continuación la muestra suele teñirse. Para ello existen muchos procedimientos, pero el más usado es la denominada "tinción de Gram". Este sistema nos permite apreciar mejor la forma de la bacteria (los cocos son esféricos, los bacilos alargados, etc.) y nos permite dividirlas en dos grandes grupos según el color que adoptan: bacterias gram positivas y gram negativas.

Otras bacterias importantes no se tiñen bien con este método y para ellas se usan otros; por ejemplo, para las bacterias (micobacterias) que causan la tuberculosis o la sífilis (treponemas).

A veces las muestras se observan "en fresco", es decir, directamente sin fijar ni teñir. De esta forma se puede ver el movimiento característico que tienen algunas bacterias.

La técnica del rayado de placas consiste en la distribución, utilizando el asa bacteriológica,de un inóculo de bacterias sobre una superficie de agar para obtener colonias separadas. A esto lo llamamos "medio de cultivo". A veces se añaden otras clases de sustancias; por ejemplo, para impedir el crecimiento de otras bacterias que podrían contaminar el cultivo.

La siembra se puede hacer en otros tipos de medios de cultivo, como tubos de vidrio con gel, frascos con líquidos nutritivos para los microorganismos, etc.

A continuación se procede a la "incubación" del medio ya sembrado. En cada caso se hace en condiciones particulares de presión de oxígeno, temperatura, agitación, duración, etc. Muchas de las bacterias patógenas crecen bien a temperaturas cercanas a los 37ºC habituales de nuestro organismo.

Si el cultivo bacteriano tiene éxito, crecerán "colonias" de bacterias en el medio de cultivo. Estas colonias tienen características de color, forma, tamaño etc. propias de cada bacteria y esto nos ayuda a identificarlas. También se puede someter a las bacterias de las colonias a pruebas bioquímicas o de otro tipo para lograr su identificación.

El trabajo que se realiza en bacteriología puede resumirse en los siguientes pasos:

1. Siembra de las muestras a estudio en los medios de cultivo adecuados y tinciones a partir de los productos originales
2. Incubación de los medios, en placa o líquidos, ya sembrados
3. Aislamiento de las colonias sospechosas -> tinciones
4. Pruebas rápidas
5. Identificación de las bacterias aisladas (paneles MicroScan, galerías API, etc)
6. Antibiograma (para el tratamiento antibiótico adecuado)

Laboratorio de Bacteriología

La mayoría de las bacterias que se aíslan en el laboratorio de microbiología clínica son agentes biológicos del grupo 2, aunque algunas están clasificadas dentro del grupo 3, y pueden crecer en medios de cultivo bacteriológicos habituales. 

• Ubicación y dimensiones
  El laboratorio de bacteriología general debe estar separado del resto de laboratorios. Debido a que en general suele ser la unidad del laboratorio de microbiología que más muestras procesa, es aconsejable que esté próxima a las áreas comunes como el área administrativa, el área de recepción y siembras o el área de limpieza y esterilización. El acceso debe estar restringido

• Diseño, instalaciones y equipos
  Todo el laboratorio de bacteriología debe cumplir con un nivel de contención 2 como mínimo. Las superficies interiores como suelos, paredes, techos, mesas y bancos de trabajo deben ser impermeables al agua y resistentes a diferentes productos químicos para permitir una fácil limpieza a fondo y una posterior descontaminación.

Debe existir al menos un lavabo, preferentemente a la salida del laboratorio, con grifos que se puedan accionar sin utilizar las manos y se recomienda que exista también un lavador de ojos dentro del laboratorio como equipo de emergencia.

Es aconsejable que el sistema de ventilación proporcione una entrada de aire sin recirculación a áreas externas al laboratorio.

El laboratorio de bacteriología general debe contar obligatoriamente con una cabina de seguridad biológica clase I, II o III (generalmente I o II), un almacenamiento de seguridad para agentes biológicos y al menos un autoclave. Los autoclaves deben instalarse en áreas separadas pero cercanas al laboratorio de bacteriología general, habitualmente en el área de preparación de medios de cultivo y/o de limpieza de material y esterilización.

Dependiendo de la carga de trabajo y de su tamaño, el laboratorio de bacteriología general puede estar dividido en pequeños laboratorios modulares que permite separar el trabajo de las diferentes muestras (exudados, hemocultivos, urocultivos etc.). Si estos módulos son completamente cerrados, es aconsejable instalar ventanillas de observación o dispositivos alternativos para poder ver a sus ocupantes.