Laboratorio Alergología

Técnicas in vitro en el diagnóstico alergológico

El estudio in vitro de los distintos parámetros inmunológicos implicados en las reacciones alérgicas, mediante un test biológico que confirme con certeza dicha reacción, va a tener una importancia definitiva no sólo en el diagnóstico, sino también en la indicación de una correcta inmunoterapia, en la instauración de un tratamiento farmacológico adecuado y, por último, en la monitorización del paciente en el curso de su enfermedad. El diagnóstico in vitro de las enfermedades alérgicas conlleva la identificación del agente causal responsable de la reacción clínica, algo que no siempre es posible debido a diversos factores que pueden depender, por una parte, de las características del antígeno implicado y de su estandarización, y por otra, de la sensibilidad y especificidad de las distintas técnicas.

Técnicas serológicas

1.-Determinación de IgE total
Constituye un marcador general de las enfermedades atópicas. Su elevación no solo se produce en las enfermedades alérgicas sino también en otras patologías. Algunos pacientes alérgicos muestran valores normales de IgE sérica total. Además, existe una variación en función del estímulo antigénico. Por ejemplo, en alérgicos al polen existen diferencias en las cifras de IgE total, según ésta se determine dentro o fuera de la estación primaveral, y esas diferencias se anulan tras el tratamiento con vacunas.

2.-Determinación de IgE específica
Esta técnica nos permite identificar en numerosas ocasiones el alérgeno causante de una reacción mediada por IgE. Existen actualmente más de 450 alérgenos frente a los que podemos medir la presencia en el suero del paciente de IgE específica, entre ellos, ácaros, pólenes, alimentos o medicamentos. La especificidad y sensibilidad de la determinación de IgE específica varía ampliamente, además, dependiendo del tipo de alérgeno.

3.-Determinación de IgG4 antígeno-específica
La determinación de IgG4 antígeno-específica puede resultar útil en dos situaciones: para el diagnóstico de patologías que no están mediadas por anticuerpos de tipo IgE (algunas enfermedades pulmonares como la alveolitis, etc.) y como seguimiento en la inmunoterapia, ya que puede servir de indicador de la respuesta a la vacuna, especialmente con veneno de himenópteros.

4.-Determinación de triptasa
La determinación de este marcador de inflamación resulta útil en el diagnóstico de las reacciones anafilácticas con participación del mastocito como, por ejemplo, reacciones anafilácticas frente a anestésicos, medicamentos, alergias alimentarias, etc.

5. Test de atopia
Determina la presencia en suero de Ig E específica frente a un grupo de alérgenos que con frecuencia son responsables de reacciones alérgicas. Este test nos permite realizar una aproximación diagnóstica de alergia en niños y también en personas a las que no se pueden realizar pruebas cutáneas.

6. Proteína catiónica del eosinófilo
La determinación de esta proteína constituye un marcador de inflamación útil en la monitorización del asma bronquial.

7. Precipitinas
Esta técnica nos ofrece la posibilidad de detectar anticuerpos precipitantes (IgG o IgM) frente a algunos antígenos y constituye una herramienta útil en el diagnóstico de enfermedades tales como la neumonitis por hipersensibilidad, la alveolitis alérgica extrínseca y la aspergilosis broncopulmonar alérgica.

Ensayos celulares

Los ensayos celulares consisten en la estimulación in vitro de células del paciente con el alérgeno que se cree que está implicado en la reacción alérgica. Posteriormente, se cuantifica, mediante citometría de flujo, la histamina o los sulfidoleucotrienos como mediadores que se producen y liberan  por las células durante la reacción alérgica de tipo inmediato. También se analiza la expresión de marcadores de activación de las células efectoras de la reacción (basófilos).

Test de activación de basófilos

El test de activación de basófilos es una técnica relativamente novedosa que  ha demostrado ser una herramienta útil en el diagnóstico de las reacciones alérgicas a diferentes alérgenos, pero de forma especial en alergia de tipo inmediato frente a fármacos, como los antibióticos, analgésicos, anestésicos y otros. La posibilidad de detectar la activación de las células efectoras de la reacción alérgica, por  la expresión de marcadores unidos a fluorocromos mediante citometría de flujo, ofrece la posibilidad de confirmar el diagnóstico y ayuda a decidir sobre la realización o no de pruebas de tolerancia.

Diagnóstico molecular de la alergia

El diagnóstico molecular de la alergia mediante microarrays constituye un complemento diagnóstico de las pruebas cutáneas y otras técnicas de diagnóstico in vitro. La técnica consiste en un  microchip de unas dimensiones de unos 5x5 mm en cuya superficie quedan fijados los 103 componentes moleculares. Tras bañar dicha superficie con los anticuerpos IgE específicos del suero del paciente, estos se fijan a los componentes. Posteriormente, se detectan estos componentes que revelan con precisión el perfil de sensibilización del paciente.